可見分光光度計常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標,標準溶液對應得濃度為橫坐標,繪制標準曲線。zui后,將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。
一般采用低雜散光,高分辨率的單光束單色器,保證了波長準確度、波長重復性和更高的分辨率。自動調0%T和100%T,自動調波長及多種方法的數據處理功能。高分辨率,寬大的樣品槽,可容納100mm光徑吸收池和相應的反射附件。儀器配有標準的RS-232雙向通訊接口,可外接打印機,打印相應的實驗數據。工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動。為了延長光源使用壽命,在不使時不要開光源燈。單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內不能拆開,為防止色散元件受潮發霉,必須經常更換單色器盒干燥劑。必須正確使用吸收池,保護吸收池光學面。光電轉換元件不能長時間暴光,應避免強光照射或受潮積塵。
可見分光光度計主要由電光系統、光學系統、光電系統、電子系統和數據處理、輸出打印系統等幾個部分組成。
(1)電光系統 :電光系統主要由氘燈、鎢燈和相應的電源組成。電光系統對整機的穩定性有很大的影響,是儀器不穩定的主要原因之一。
(2)光學系統:光學系統包括外光路系統(轉向平面鏡、聚光鏡)、單色器兩個主要部分;其中,外光路和單色器各有很多類型。單色器是紫外可見分光光度計雜散光的主要來源,是整機使用時,主要分析誤差的來源之一。
(3)光電系統:夕光電系統是將光信號變為電信號的關鍵部件,直接影響儀器的靈敏度和適用范圍;一般有光電管、光電倍增管、硅光電池、二極管陣列等。
(4)電子系統 :電子系統主要由放大器、A/D變換器等組成;其中的放大器,也是影響整機靈敏度、穩定性的主要部件。它又是儀器噪聲的主要來源部件,直接影響紫外可見分光光度計的分析誤差。 、-
(5)數據處理、輸出打印系統 :數據處理、輸出打印系統是決定整機的自動化程度的關鍵部件;特別是軟件部分,直接影響紫外可見分光光度計的質量。