可見分光光度計是一種用于測量溶液中吸收和透射的光強度的儀器。其工作原理基于比爾-朗伯定律,該定律指出物質在特定波長的光線下吸光度與其在樣品中的濃度成比例。光路由一系列部件組成。Light源通常采用白熾燈或鎢絲燈。這些來源發出了大量連續譜光,并經過凹面反射鏡聚焦到單一聚焦點上。該點發出的光然后通過進入光柵去除非參考光波長。光量可調節使它達到所需強度。
目標溶液在試管或玻璃杯中放置在一個透光桶中。(調制)視樣本容積而改變著的尺寸通常為1厘米,在通道是0.2毫米時也可能小于這個數量外。這對于獲得準確而有用的結果至關重要。操作者需要校準設備以確保利用長度。樣品通過后,由光檢測器接收透射光信號。并將光強度轉化成電流或電壓輸出。由不同波長的樣本所吸收的可見光譜區間提供建立的系統標準以及衡量其種類。這只是設備在計算,突出顯示或輸出分析結果時刻發揮作用的操作步驟。
和極多數的實驗室儀器一樣,在硬件部分的工作基礎上還需要軟件來解決數據解讀、優化和管理問題。分光光度計通常具有專門的應用程序,使得研究人員能夠輕松地準確識別溶液中的特定物質,然后加以定量或用于額外分析。廣泛應用于環境監測、食品安全、醫藥研發等領域。它可以用來測定物質吸收或透射不同波長可見光時的相對強度,從而得出樣品中某種化合物的存在濃度。正確選擇和使用可見分光光度計能夠提高工作效率和檢測準確度。
可見分光光度計的選型經驗介紹:
測量范圍:通常具有所謂的線性動態范圍,即在該范圍內測量結果與樣品濃度成正比。如果需要測量較高或較低濃度,則要選擇相應比較大或小的線性動態范圍的儀器,以避免結果失真。
分辨率:影響結果準確度的一個因素是分辨率,也就是儀器所能區分的兩個信號之間的差異。分辨率越高,理論上結果越準確。一般要根據實驗需求選擇一款分辨率合適的儀器。
波長范圍:可見分光光度計能夠測量的波長范圍通常在300~800nm之間,不同儀器的覆蓋范圍有所不同。選擇時要確認需要測量的化合物的吸收峰是否在可見光波段內,否則需要考慮其他類型的分析儀器。
自動化程度:配備了自動清洗和校準功能,可以提高實驗效率和結果的準確度。如果實驗室需要同時處理大量樣品,這些功能會非常有用。
軟件支持:部分提供專業的軟件支持,包括自動數據記錄、曲線擬合和統計分析等功能。如果實驗需要生成復雜的報告或進行后續分析,選擇擁有適當軟件支持的儀器是很重要的。